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【文献解读】川崎病治疗靶点最新研究

川崎病的发病机制目前还不太明确,因此诊断治疗相关的方向成为了研究热点。有报道曾提示先天性免疫问题和一些信号通路可能参与川崎病急性期的异常免疫调控和发病。研究发现miR-93负责调控VEGFA mRNA的表达,预示它在川崎病的急性期发病过程中的重要作用。miR-200c 和 miR-371-5p在川崎病患者抗炎治疗前后的由高转低表达,可以用于预测川崎病治疗方法的响应,有望作为治疗的靶点。FCN1是静脉注射IVIG的分子靶点,抗FCN1的人源单克隆抗体和上述抑制结合的多肽,有望作为IVIG的联合治疗方法。

川崎病一线的治疗方式是静脉注射丙种球蛋白 (intravenous immunoglobulin,IVIG) 结合阿司匹林口服,对于IVIG无响应的情况,最常选用的方法是IVIG二次注射、IVIG结合泼尼松龙 (prednisolone) 和英夫利昔 (Infliximab),其他替代方法还有环孢霉素(cyclosporin)、阿那白滞素 (Anakinra)、环磷酰胺 (Cyclophosphamide) 和血浆置换(Plasma exchange) (McCrindle et al., 2017) 。目前为止,川崎病的发病机制还不太明确,和诊断治疗相关的方向成为了研究热点。

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有报道提示先天性免疫问题和一些信号通路可能参与川崎病急性期的异常免疫调控和发病,比如TGF-β信号通路、NF-κB信号通路和VEGF信号通路。

研究通过miR和mRNA芯片,检测川崎病组和健康对照组外周血单核细胞 (PBMC) 中的小RNA和基因表达情况,发现miR-182 和miR-296-5p在急性发热期高表达,miR-93, miR-145-5p, miR-145-3p和 miR-150-3p在退热期高表达;此外血管内皮生长因子A(VEGFA)在急性发热期高表达,在治疗退热后趋于正常,且和miR-93的表达呈负相关。

RT-PCR验证了部分miRNA和mRNA的表达。ELISA结果显示血浆VEGF-A水平和PBMC中VEGFA表达量同步。血浆VEGF-A和川崎病患者冠状动脉损伤(CAL)的发展有关,VEGF-A结合到血管内皮的VEGF受体1或2上,间接通过NO释放促进血管生成、巨噬细胞、中性粒细胞的趋化作用以及血管扩张。

体外实验也证明VEGF-A可以刺激内皮细胞有丝分裂和细胞迁移。VEGF-A还是一类血管舒张药物用于增加微血管通透性。因此miR-93负责调控VEGFA mRNA的表达,预示它在川崎病的急性期发病过程中的重要作用。

另有研究人员通过大样本量的川崎病组(细分为IVIG响应组和无响应组、结合血浆置换组和无血浆置换组)和健康对照组中血浆miRNA的RT-PCR表达量检测,发现IVIG无响应组和结合血浆置换组中miR-200c 和 miR-371-5p表达量高。

有研究称miR-200c通过靶向ZEB可增加糖尿病小鼠的血管平滑肌细胞内的促炎反应;而且 miR-200c 和 miR-371-5p预测靶基因的相关代谢通路也和炎症反应有关。促炎细胞因子在川崎病的发病过程中起到主要作用,可以通过抗炎治疗川崎病。

因此这2个miRNA在川崎病患者抗炎治疗前后的由高转低表达,可以用于预测川崎病治疗方法的响应,有望作为治疗的靶点。

研究通过IVIG治疗前后川崎病组和健康对照组间的mRNA芯片表达差异分析和RT-PCR验证,发现FCN1 (M-ficolin) 在大部分IVIG治疗后川崎病患者中表达量显著下调,而且通过Western blot验证也得到了相同的结果。同时通过不同队列的川崎病和健康人群验证FCN1在IVIG治疗后显著降低。

研究人员还通过Western blot确定了FCN1在IgG上的结合位点IgG-3-d 和CH1p-3;另外还发现了IgG1来源的多肽可以抑制两者的结合,共有三个多肽分别是IgG-3-d-3、IgG-3-d-5和CH1-10。

因此推断FCN1是静脉注射IVIG的分子靶点,抗FCN1的人源单克隆抗体和上述抑制结合的多肽,有望作为IVIG的联合治疗方法。


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1FCN1IgG的结合位点(上2)及IgG来源多肽(下2



参考文献(节选)

1. McCrindle BW, Rowley AH, Newburger JW, Burns JC, Bolger AF, Gewitz M, Baker AL, Jackson MA, Takahashi M, Shah PB, Kobayashi T, Wu MH, Saji TT, Pahl E; American Heart Association Rheumatic Fever, Endocarditis, and Kawasaki Disease Committee of the Council on Cardiovascular Disease in the Young; Council on Cardiovascular and Stroke Nursing; Council on Cardiovascular Surgery and Anesthesia; and Council on Epidemiology and Prevention. Diagnosis, Treatment, and Long-Term Management of Kawasaki Disease: A Scientific Statement for Health Professionals From the American Heart Association. Circulation. 2017 Apr 25; 135(17):e927-e999. doi: 10.1161/CIR.0000000000000484. Epub 2017 Mar 29.

2. Saito K, Nakaoka H, Takasaki I, Hirono K, Yamamoto S, Kinoshita K, Miyao N1, Ibuki K, Ozawa S, Watanabe K, Bowles NE, Ichida F. MicroRNA-93 may control vascular endothelial growth factor A in circulating peripheral blood mononuclear cells in acute Kawasaki disease. Pediatr Res. 2016 Sep;80(3):425-32. doi: 10.1038/pr.2016.93. Epub 2016 Apr 18.

3. Zhang W, Wang Y, Zeng Y, Hu L, Zou G. Serum miR-200c and miR-371-5p as the Useful Diagnostic Biomarkers and Therapeutic Targets in Kawasaki Disease. Biomed Res Int. 2017;2017:8257862. doi: 10.1155/2017/8257862. Epub 2017 Jun 1.